免疫增强剂范例(3篇)

免疫增强剂范文

胞壁酰二肽类免疫增强剂是指包括胞壁酰二肽（MuramyldipPetide，MDP）在内的一类具有免疫调节活性的MDP衍生物和类似物。MDP是分枝杆菌细胞壁骨架中的主要免疫活性单元，主要成分为N-乙酞胞壁酸-L-丙氨酸-D-异谷胺酞胺。可通过口服、皮下、静脉等多种途径进入体内，在机体内发挥强烈的生物学效应，能够增强机体的免疫应答能力，提高疫苗、菌苗、病毒亚单位及寄生虫苗的保护力。同时，MDP还可通过非特异性免疫应答，激活机体免疫系统中的巨噬细胞、树突状细胞和NK细胞等发挥抗肿瘤免疫作用。MDP类免疫增强剂的生物学活性主要表现为：①抗辐射作用：MDP类免疫增强剂在抗辐射方面显示出了独特优势。有关试验证实，在照射800拉德的LACA小鼠的后腹腔内注入MDP和cp-cws(短棒杆菌细胞壁骨架)联合制剂，加入MDP后的抗辐射效果比单给予cp-cws的效果显著增加，MDP在抗辐射方面起着主导作用，可明显提高照射小鼠的存活率。②非特异性抗感染作用:作为疫苗佐剂，MDP及其类似物和衍生物不仅能增强特异性抗感染效果，还能增强免疫系统正常或缺陷的动物对多种病原体（如肺炎杆菌、大肠杆菌、绿脓杆菌及白色念珠菌等）感染的非特异抵抗力，并与抗生素有协同作用。一般认为，MDP及其衍生物的抗感染作用原理是增强多形核白细胞、MΦ以及网状内皮细胞的功能，有效地提高机体的防御能力。③抗肿瘤作用：MDP及类似物和衍生物作用于MΦ受点上，通过酪氨酸蛋白激酶（PTK）和/或蛋白激酶C（PKC）途径触发并激活.单核—巨噬细胞的吞噬、合成及分泌功能，促进IL-l、IL-2、IL-4、TNF等多种细胞因子的产生;增强NK细胞和抗体依赖性细胞毒细胞的活性，发挥非特异性杀肿瘤作用。在肿瘤疫苗制备中，MDP及类似物和衍生物常作佐剂应用，以增强肿瘤抗原的免疫原性。MDP及类似物和衍生物对纤维肉瘤和肝细胞瘤等肿瘤细胞生长有一定的非特异性抑制作用，包埋在微脂粒（liposome）中给药，作用明显增强。另外，MDP及类似物和衍生物还与内毒素、脂多糖（LPS）或化疗药等有协同抗肿瘤作用。

2胞壁酰二肽类免疫增强剂的研究状况

MDP及类似物和衍生物具有超强的免疫活性，曾被认为是最具有市场前景的免疫调节肽之一。关于MDP类免疫增强剂的研究，欧美及日本等国家开展的较早、较多，我国相对滞后。早在上个世纪80年代，英国的NeromeK等［1］就曾报道，用一株泰国株甲型流感H3N2与MDP及胆固醇制成的脂质体亚单位疫苗，腹腔注射免疫小鼠，血凝抑制试验结果表明，该亚单位疫苗所诱导的小鼠外周血抗HA抗体水平比对照组游离HANA（f-HANA）亚单位疫苗高出16倍，且这种高抗体水平至少可持续6个月。小鼠和豚鼠脾淋巴细胞增殖实验亦得到相似的结果，其对脾淋巴细胞增殖的刺激指数远高于f-HANA及加有弗氏完全佐剂的疫苗；日本第一制药株式会社的冲正信等［2］近年来研究出了新型胞壁酰二肽衍生物以及含该衍生物的流行性感冒疫苗，具有优良的抗体产生能力和安全性；近年来，英国的Yoo［3］也研究发现，MDP的两种亲脂性衍生物B30-MDP和MDP-Lys（L18）能明显增强B-1病毒灭活疫苗诱导汉坦病毒免疫应答的佐剂作用。我国关于MDP的研究主要集中在人用疫苗佐剂、非特异性抗肿瘤和非特异性的抗感染及其他生物学活性的应用等。田世昭等［4］研究发现，无论用MDP代替FCA中的分枝杆菌与BSA或卵清蛋白（OA）盐水溶液制成水/油乳剂，还是用水溶液与上述抗原配合，经皮下或静脉注射、或口服MDP，均可明显提高小鼠和豚鼠中相应抗体的产生，并能诱导对该抗原的DHR；宁晓燕等［5］将反胰岛素样因子Ⅱ、MDP包裹于脂质体中，同时转导入体外培养的HepG2人肝癌细胞株中、注射于裸鼠皮下人肝癌移植瘤内。结果发现反义胰岛素样因子Ⅱ与MDP联合应用具有明显的抗肝癌作用；庞宏艳等［6］从炎症的角度对FLZ防治神经退行性疾病的作用及作用机理进行了研究，结果发现MDP-C对炎症性记忆的退行恢复具有较好的改善作用；李树新等［7］研究了胞壁酰二肽（MDP）对家兔睡眠的影响及其与肿瘤坏死因子（TNF）的关系，结果MDP的催眠作用与其影响TNF有关。MDP在畜禽上的研究与应用，目前国内外鲜见报道，至今还未见有MDP及其衍生物或类似物的正规获批兽用产品应用，相关可查阅的文献也甚少。国内仅见有某公司［8］有关MDP衍生物能够提高猪的胃肠道免疫力的一两篇新闻报道，但资料不详，未见有公开、可参考的实验数据。

免疫增强剂范文篇2

目的研究人工合成的cpgodn对乙肝表面抗原的免疫增强效应，评价cpgodn的佐剂效应。方法将不同剂量特定的cpgodn与乙肝表面抗原联合免疫小鼠，用elisa检测小鼠乙肝表面抗体的滴度。结果cpgodn联合乙肝表面抗原免疫小鼠，在短期检测中，高剂量组能较快的达到检测阈，各剂量组间抗体滴度检测值差异有显著性(p<0.05)，在长期检测中，各剂量组间抗体滴度检测值差异有显著性(p<0.05)，检测值随cpg剂量的增高而增大。结论cpgodn增强乙肝表面抗原的免疫反应短期和长期都具有剂量效应。

【关键词】cpgodn乙肝表面抗原免疫佐剂体液免疫

studyoftheimmunologicalenhancementofhbvvaccinewithcpgodn

daifan,dongbing,guoxiaolei,shibizhu,fanglijuan,mojialin,tiansujuan,mengminjie

(schooloflifesciencesandbiopharmaceutics,guangdongpharmaceuticalcollege,guangzhou,guangdong510006,china)abstract:objectivetoinvestigatetheeffectsofimmunologicalenhancementofhbsagwithsyntheticcpgoligodeoxynucleotides,evaluatetheadjuvanteffectofcpgodn.methodsmicewerevaccinatedwithcpgoligodeoxynucledtidesandhbsagatdifferentdoses,andthentitersofhbsabinthebloodserumsofmiceweredetectedwithelisa.resultscpgodnandhbsagimmunizethebalb/cmice,thehighdosegroupcouldbedetectedquicklyinshotterm,thelevelsofantibodiesingroupswhichusedifferentdosesofcpgodnandhbsagweredifferentinstatics(p<0.05),inlongtermthelevelsofantibodiesingroupswhichusedifferentdosesofcpgodnandhbsagweredifferentinstatics(p<0.05),thelevelsofantibodieswerecorrespondedwiththelevelsofcpgodn(p<0.05).conclusiontheimmunologicaleffectofhbsagwasenhancedwithcpgodnasadjuvantinshortandlongterms.

keywords:cpgodn;hbsag;immunoadjuvant;humoralimmunity

cpg基序是一种具有非特异性免疫刺激能力的dna序列，为非甲基化的胞嘧啶鸟嘌呤二核苷酸重复序列。www.133229.coMcpgodn(unmethylatedcpgmotifbasedoligodeoxynucleotide)是人工合成的含未甲基化cpg基序的寡核苷酸序列。cpgodn可刺激人类和多种动物产生自然免疫和获得性免疫，主要通过tlr9信号系统活化免疫系统，最终促使多种免疫细胞的成熟分化和增殖，包括b淋巴细胞、t淋巴细胞、nk细胞、单核细胞、巨噬细胞和dc细胞。cpgodn能快速活化t、b细胞，诱导th1型免疫反应并能促进抗原递呈细胞的增生和成熟[1]。现阶段我国对乙型肝炎的预防主要是通过注射乙型肝炎疫苗，但接种免疫过程中和接种免疫后会出现免疫较弱和不免疫现象[2,3]。所以，选择一种安全有效的免疫佐剂是增强免疫效果的有效途径。本文通过测定不同时间段的小鼠注射cpgodn和乙肝表面抗原后的抗体滴度，评价cpgodn作为免疫佐剂增强乙肝疫苗的免疫效果。

1材料与方法

1.1材料

1.1.1动物balb/c小鼠，雄性，6周龄，体质量18～22g，spf级，购自中山大学实验动物中心，许可证号：scxk(粤)20040011。

1.1.2试剂血源性乙肝表面抗原购自上海前尘生物，cpgodn由本实验室保存。

1.2动物分组及免疫方案

1.2.1动物分组50只balb/c小鼠根据随机分配表，随机平均分成5组：第1组为hbsag和高剂量cpgodn联合免疫组，第2组为hbsag和中剂量cpgodn联合免疫组，第3组hbsag和低剂量cpgodn联合免疫组，第4组为hbsag单用组，第5组为生理盐水对照组。各组饲养条件相同。

1.2.2动物免疫分别于第0、2、4周免疫balb/c小鼠，每次免疫剂量相同。第1组：尾静脉注射含2μghbsag和100μgcpgodn生理盐水溶液，100μl/只;第2组：尾静脉注射含2μghbsag和1μgcpgodn生理盐水溶液，100μl/只;第3组：尾静脉注射含2μghbsag和10ngcpgodn生理盐水溶液，100μl/只;第4组：尾静脉注射含2μghbsag生理盐水溶液，100μl/只;第5组：100μl生理盐水/只。

1.3乙肝表面抗原检测

1.3.1血清采集断尾后玻璃毛细管采血，室温自然凝固，常温离心后取上清，-20℃保存。

1.3.2抗原检测96孔板用碳酸氢钠缓冲液(15mmol/lna2co3，355mmol/lnahco3，ph9.6)适当稀释的乙肝表面抗原包被，4℃过夜孵育。用含tween20的pbs(0.1mol/lpbs,0.1%tween20)洗涤3次，每次间隔3min，每孔加入100μl经pbs(0.1mol/lpbs,1%bsa)适当稀释的待测血清，37℃孵育90min。pbs洗涤5次，每孔加入100μl

1000倍稀释的hrp标记的乙肝表面抗原，37℃孵育40min。pbs洗涤5次，每孔加入100μltmb底物(含0.1mg/ml3’3’5’5’四甲基联苯胺的磷酸盐柠檬酸缓冲液，ph5.4，用前加5ml30%h2o210ml)，37℃孵育1h。每孔加入100μlh2so2(0.2mol/l)终止显色反应。biorad680测定a450/630读数。

1.4统计学分析

应用spss统计软件，采用重复测量方差分析对数据进行分析，p<0.05为差异有显著性。

2结果

2.1小鼠免疫后7～28d外周血中乙肝表面抗体的平均滴度变化

乙肝表面抗原单用组的抗体在7～17d时间段内检测不到，乙肝表面抗原和低剂量cpgodn联合免疫的抗体在第14天检测到，乙肝表面抗原和中剂量cpgodn联合免疫组的抗体在第10天检测到，乙肝表面抗原和高剂量cpgodn联合免疫的抗体出现时间较早，在第7天即可检测到。在第14～28天的各个时间点上，乙肝表面抗原和高剂量cpgodn联合免疫组的抗体滴度均显著高于乙肝表面抗原和中剂量cpgodn联合免疫组、乙肝表面抗原和低剂量cpgodn联合免疫组(p<0.05);在第14、17、21天时间点上，乙肝表面抗原和中剂量cpgodn联合免疫组、乙肝表面抗原和低剂量cpgodn联合免疫组之间差异无显著性(p<0.05)，在第24、28天时间点上，两组差异有显著性(p<0.05);在第21、24、28天时间点上，乙肝表面抗原和中剂量cpgodn联合免疫组、乙肝表面抗原和低剂量cpgodn联合免疫组的抗体滴度均显著高于乙肝表面抗原单用组(p<0.05)。见图1和表1。表1免疫7～28dhbsab滴度对数转换数据

2.2小鼠免疫后3～8周外周血中乙肝表面抗体的平均滴度变化

在第3～8周时间内，第4周乙肝表面抗原和高剂量cpgodn联合免疫组、疫苗和中剂量cpgodn联合免疫组之间的抗体滴度差异有显著性(p<0.05);在其他时间点上，乙肝表面抗原和高剂量cpgodn联合免疫组的抗体滴度与其他组别差异均有非常显著性(p<0.01)，并持续快速升高。乙肝表面抗原和中剂量cpgodn联合免疫组、乙肝表面抗原和低剂量cpgodn联合免疫组的抗体滴度从第3周之后均逐渐升高，在第3、4、5、6周时间点上，只有第4周两组之间差异有显著性(p<0.05)，其他时间点差异均无显著性(p<0.05);到第7、8周时两组差异有显著性(p<0.05)。对于乙肝表面抗原单用组，虽然抗体滴度有逐渐升高的趋势，但却一直处于比较低的水平，除了第4周与乙肝表面抗原和低剂量cpgodn联合免疫组之间的抗体滴度差异无显著性外(p>0.05)，其他时间点上与其他各组差异均有显著性(p<0.05)。见图2和表2。表2免疫3～8周hbsab滴度对数转换数据

3讨论

对于cpgodn的免疫刺激作用人们已经进行了大量的研究。在应用方面，人们较为关注其安全、有效的佐剂特性。因为cpgodn能同时增强抗原特异性体液免疫应答和细胞免疫应答，尤其对细胞免疫应答具有更突出的增强作用[4]。本实验发现,应用cpgodn作为乙肝表面抗原的佐剂，能较早较快地刺激机体产生乙肝表面抗体，cpgodn作为佐剂使用增强乙肝表面抗原的免疫效应，cpgodn的使用量在实验的剂量范围内具有一定的剂量效应关系，高剂量的cpgodn的使用对增强乙肝表面抗原的免疫效应效果更早更好。由实验数据观察来看，单纯的乙肝表面抗原抗原性是较弱的，搭配佐剂使用，才能有效地提高乙肝表面抗原的免疫原性[5]，提高乙肝表面抗原的免疫效果。实验剂量范围内，增强乙肝疫苗抗原抗体反应是显著的，并且动物也无逆毛、腹泻、发热或其他中毒现象等任何异常，表明cpgodn的使用是安全可靠的。

cpgodn的作用是通过有toll样受体家族的细胞，主要是tlr9受体识别cpg的基序，从而通过若干信号传递途径活化转录因子，启动相关细胞因子的基因转录[6]。本实验所用的cpgodn是将60bp磷酸二脂修饰的odn与puc18载体体外连接构建的重组质粒puc18odns，更真实地模拟了天然的包含cpg基序的非甲基化的odn。在免疫过程中，cpgodn以模拟细菌感染的方式激活了细胞经由tlr9通道的固有免疫[6]，由于cpgodn仅仅是一段dna序列，在激活免疫的同时不具有感染性，小鼠未发生任何炎性反应[7,8]。同时，cpgodn激活了体内的免疫细胞，调动了免疫系统，使乙肝疫苗能够较早较快的产生免疫反应[7,8]。由于cpgodn的免疫刺激作用，小鼠的机体可以较长时间的处于免疫活化状态，免疫细胞免疫活性高，乙肝表面抗体得以长期高水平的经由b细胞分泌[7,8]。在有的实验中，大量的细菌dna产生抗双链dna的自身抗体，加重小鼠的自身免疫性疾病;在本实验中使用cpgodn，乙肝表面抗体产生早，滴度高，持续久，并且安全可靠。在应用cpgodn作为乙肝疫苗佐剂的临床试验中，首次和第2次免疫后抗体水平甚至可以提高13～45倍[9];同时，由于cpg对cd8+t细胞刺激作用，诱导的ctl细胞在细胞免疫作用杀伤肿瘤以及治疗胞内感染也具有很好的应用前景[10]。但是对长期性观察的缺失，还不能够全面反映cpgodn的作用效果，长期效应的机制也未被揭开。

本研究结果表明，本实验室制备的cpgodn作为乙肝表面抗原的佐剂能较早较快地促进乙肝表面抗原的抗原抗体反应，并且安全可靠。在长期效应上，cpgodn作为佐剂对维持乙肝表面抗体的有效滴度具有长期效应。

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免疫增强剂范文

像琦琦这样的孩子，生活中不在少数。很多父母都曾有过或正在经历着类似的事，对于这种抵抗力极差的孩子，家长们看在眼里，难受在心里。如何增强体质，提高免疫力成为家长们最大的一块心病。

现在的孩子多是温室里的花朵，由于家人的精心呵护而少经风雨，加上不良的饮食习惯造成的营养不均衡，要么营养过剩，要么营养不良，与缺乏必要的锻炼共同构成了导致众多儿童免疫力低下的重要因素。

针对以上这些情况，家长应协助孩子们做到：

1、合理安排饮食，注意鱼、肉、蛋、奶、瓜果蔬菜等食物的摄取，尽量做到饭菜营养丰富、均衡，荤素搭配合理。

2、培养孩子养成规律、健康的生活习惯，不挑食、不偏食，保证充足、规律的睡眠。

3、选择合适的运动方式，让孩子多做户外运动，每天坚持适量、适度的体育锻炼，活动时间不可过长，安排宜由少到多，逐渐增加，以不累为度，在运动后及时洗浴或换上干净、干燥的衣物，避免孩子受凉。

4、室内要经常开窗，保持空气流通，减少细菌、病毒在室内停留的机率。平日尽量少带孩子去超市、医院、商场等人流量大且空气流通差的地方。

5、保持良好的精神状态，让孩子心情愉快的生活。

以上都是些针对孩子日常生活中增强体质、提高免疫力的常规办法，需要长时间坚持方能起到显著效果。对于一些免疫力特别低下的孩子，当他们面临一些非常时期、非常情况时，以上方法无法在短时间内奏效，那么我们不妨考虑一些免疫制剂，做为应急之需。下面我们来就几种常见的免疫制剂做以介绍：

一、胸腺肽

是从小牛或猪胸腺提取的可溶性多肽混合物，包括胸腺素、胸腺生成素等可促进胸腺中前T细胞发育分化为成熟的免疫细胞―T细胞，促进T细胞对抗原或丝裂原的刺激反应和产生细胞因子促进T细胞分化。胸腺肽无种属特异性，亦无明显不良反应，常用于治疗反复呼吸道感染等免疫功能低下症、肝炎、肿瘤、肺结核等继发性免疫缺陷症、类风湿系统性红斑狼疮等自身免疫性疾病。

二、丙种球蛋白

是一种由健康人血浆，经低温乙醇法分离提取并经病毒灭活处理的免疫球蛋白制品。含有大量广谱抗菌和抗病毒IgG抗体，它通过提供非特异抗体，使机体产生被动免疫保护，从而提高对病毒的抵抗力，可用于感染性疾病的预防性治疗，但保护效果短暂，需不断注射，且来源有限。

丙种球蛋白不宜滥用，多次注射易引起超敏反应，如：给无麻疹接触史者注射，使其不易产生隐性感染，反而使易感人群增多。

三、转移因子

是从正常人白细胞中提取的小分子肽类物质。转移因子通过激发人体的免疫潜能，抵御、消灭病毒和细菌侵入机体，它能将供体的免疫信息转移给受体，机体接到这种信息后，体内的免疫信息被激活，当再次遇到这类病毒或病菌入侵后，能立即产生反应，迅速吞噬和消灭体内的病原微生物，从而提高抗病能力。转移因子只转移细胞免疫，而无体液免疫作用，多用于治疗免疫缺陷性疾病，肝病及肿瘤等。

四、人白细胞介素-2

是一种白细胞产生的淋巴因子，能促进细胞毒性T细胞、自然杀伤细胞和淋巴因子活化的杀伤细胞增殖，并使其杀伤活性增强，还可以促进淋巴细胞分泌抗体和干扰素，从而产生抗病毒和增强免疫功能的作用，多用于自身免疫疾病、肿瘤等疾病的治疗。它在体内维持时间短，价格昂贵，并且来源有限。另外它有可能引起过敏发热，皮下结节等反应，用药应在医生指导下进行。

五、左旋咪唑

原为驱虫药，后来发现其能激活吞噬细胞吞噬功能，促进T细胞产生IL-2等细胞因子，增强NK细胞活性，对免疫功能正常者无明显作用，对免疫功能低下者有逆转作用。主要用于免疫功能低下导致的慢性反复感染者的辅助药物。其常规用法为每周2次，2.5~3mg/kg/天。通常以3个月为一疗程。

专家介绍

免疫是针对外来病原微生物而产生对机体有利的抗感染防御能力，根据作用方式及特点的不同，机体存在先天性免疫（即固有性免疫）和适应性免疫（即获得性免疫）两种。前者是个体出生时就具有的天然免疫，可通过遗传获得；而后者则是个体出生后，接触生活环境中的多种异物抗原，并在不断刺激中逐渐建立起来的后天免疫。获得性免疫包括细胞免疫（通过细胞和各种因子直接杀灭病原菌）和体液免疫（通过产生抗体清除病原菌），免疫力的强弱决定一个人对疾病易感性的大小，免疫调节剂是通过促进机体免疫细胞的活性，诱导机体主动产生抗体或被动输入抗体等方式，提高免疫功能的制剂。

专家建议

免疫制剂的使用，一定要特别慎重。

首先，为孩子选用免疫制剂，必须经过诊查，确认孩子免疫力低下，方可考虑使用。临床上免疫力低下症常见的有反复呼吸道感染等疾病。

其次，在确定需使用免疫制剂时，其使用必须在医生的指导下规范使用。

因为免疫增强剂可通过不同方式增强、促进、调节机体的免疫功能，用于治疗免疫功能低下的相关疾病，一般在机体免疫功能还存在，体内病原或肿瘤细胞数量不多的情况下使用，可以发挥良好的疗效。但正常情况下人体免疫系统会自动将人体的免疫能力调到一个合适的、行之有效的水平。对于免疫功能低下的老人和儿童应用免疫调节剂，可增强机体免疫力，促进身体康复，以“迪赛”河山胸腺肽为例，专家建议通常每次5~10mg，1次/每天或隔日，以1~3个月为一疗程。

最后，免疫制剂的购买，必须通过正规渠道，购买疗效确切、质量可靠厂家的产品。

近年来不断有资料报道，免疫缺陷和体内微量元素的缺乏均可导致免疫力低下，如缺锌易使儿童胸腺、脾功能降低或萎缩，使T细胞功能降低而影响免疫力水平，针对这种情形可适当补充锌制剂，即可改善孩子免疫力水平低下的情况。

除此之外，香菇等菌类食物、中药中的黄芪、人参、枸杞、灵芝等亦有提高免疫力的作用，可酌情使用，但需谨慎。中医认为，免疫力低下是机体正气不足，以致不能抵御外邪入侵所致，所以可用玉屏风散来提高机体的免疫力，临床上经证实确有疗效。另外中医推拿对提高儿童提高免疫力也有显著效果。

免疫制剂的选用只是标，提高免疫力的根本仍在于加强锻炼，增强体质，用良好的生活习惯来改善自身状况。

因此无论我们家长采用哪种方式来提高孩子的免疫力，我们都必须根据孩子的实际情况，遵循专家的建议，合理选用、正规使用、标本兼治。